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非蛋白质巯基测试盒实验科研

更新时间:2021-05-07      浏览次数:786

非蛋白质巯基测试盒实验科研

 

测定意义:生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能,对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。

测定原理:巯基基团与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有最大吸收峰。

需要的仪器,耗材:天平、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和甲醇。

非蛋白质巯基测试盒实验科研

样本处理

1.动物、植物组织:称取约 0.1g,加入 1mL 的提取液,制备成 10%的匀浆,10000g,常温离心 10min,取 上清待测。

2.细胞或细菌:按照细胞数量(10 4个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min)然后 10000g,常温离心 10min, 取上清置冰上待测。

3.血清(浆),培养液:向 0.1mL 血清(浆)或培养液中加入 1mL 提取液,10000g,常温离心 10min,取上 清待测。
 

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