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果糖-1,6-二磷酸酶测试盒使用说明

更新时间:2021-04-21      浏览次数:844

果糖-1,6-二磷酸酶测试盒使用说明

测定意义:果糖-1,6 二磷酸酶又称果糖1,6 二磷酸酯酶,催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和无机磷,在糖的异生代谢和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。

测定原理:FBP 催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和无机磷,在反应体系中添加的磷酸葡萄糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下测定NADPH增加速率,即可计算FBP 活性。

需自备的仪器和用品:分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。


样本处理
1、组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)进行冰 浴匀浆。于 4℃,8000g,离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、细胞:按照细胞数量(10 4 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min),于 4℃,8000g,离心 10min, 取上清,置冰上待测。

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