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上海仁捷生物发布-猪(NGAL2)elisa检测原理

更新时间:2017-06-29      浏览次数:1356

猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白2NGAL2试剂盒(ELISA)试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白2NGAL2)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白2NGAL2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

试剂盒组成:

 

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

8孔×12

8孔×6

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

1.  标准品浓度依次为:240、120、60、30、15、7.5 pg/mL

2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过zui大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

 

实验结果计算

所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程将样品的OD值代入方程,计算出样品浓度。(例如下图)

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试剂盒性能

  •  检测范围7.5 pg/mL  240 pg/mL
  •  灵敏度:zui低检测浓度小于1.0 pg/mL
  •  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
  •  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 
  •  

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