大鼠 25 羟基维生素 D(25-OH-VD)ELISA试剂盒简介
英文名称: Rat 25-OH-VD ELISA Kit
实验类型: 竞争法
检测范围: 3.13-200 ng/mL
灵敏度:1.4ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆 和 其他生物液体
25-OH-VD 简介:25 羟维生素 D(25-OH-VD)是维生素 D 在体内的主要存在形式。维生素 D主要通过日照条件下皮肤合成,少部分可经饮食获得。维生素 D 为类固醇衍生物,属脂溶性维生素,为环戊烷多氢菲类化合物。维生素 D 不仅仅影响钙磷代谢,而且具有广泛的生理作用,是维持细胞生长和发育的的物质,与多种疾病密切相关。维生素 D 在肝脏中通过羟基化作用转化成 25-羟基维生素 D(25-OH-VD),然后在肾脏中转换为具有活性的 1,25-二羟基维生素D.
实验原理:本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠 25 羟基维生素 D(25-OH-VD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、HRP 标记的抗原,中间经过温育和洗涤,用底物 TMB 显色,TMB 在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠 25 羟基维生素 D(25-OH-VD)呈负相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
灵敏度:1.4ng/mL特异性:可检测样本中大鼠的 25-OH-VD,且与其类似物无明显交叉反.
在选取的健康大鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的大鼠25-OH-VD,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
血清(n=8) | 81-101 | 96 |
血浆(n=8) | 92-105 | 101 |
细胞培养上清(n=8) | 97-108 | 105 |
分别在选取的4份健康大鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度大鼠25-OH-VD,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清 |
1:2 | 范围(%) | 83-95 | 88-96 | 90-110 |
平均回收率(%) | 91 | 93 | 96 | |
1:4 | 范围(%) | 89-104 | 87-108 | 105-115 |
平均回收率(%) | 93 | 98 | 110 |