大鼠Elisa试剂盒样品处理及保存方法

更新时间：2022-09-26

浏览次数：1044

　　大鼠Elisa试剂盒是通过酶联免疫吸附反应进行实验来检测特定物质的试剂盒，试剂盒中会有不同浓度的标准样品，在酶标条中通过固相的抗原或抗体，酶标记的抗原或抗体，酶作用的底物反应可形成标准曲线，从而进行试验样品的测定。

　　大鼠Elisa试剂盒的样品收集、处理及保存方法：

　　1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

　　3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

　　5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

　　大鼠Elisa试剂盒操作步骤：

　　1.通过计算并确定一次性实验所需的板条数，取出所需板条放置在框架内，暂时用不到板条请放回铝箔袋密封，保存于4℃。

　　2.建议设置本底较正孔，即空白孔，设置方法为该孔只加TMB显色液和中止液。每次实验均需做标准品对照并画出标准曲线。

　　3.分别将标本或不同浓度标准品（100u1/孔）加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120分钟。对于血清或血浆标本，请加入50u1样本分析缓冲液后加50u1标本，如稀释量大，请将样本与样本分析缓冲液等量加入，不足部分用标准品稀释液补充至100ul。

　　4.洗板5次，且置厚吸水纸上拍干。

　　5.加入生物素化抗体工作液（100u1/孔）。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育60分钟。

　　6.洗板5次，且置厚吸水纸上拍干。

　　7.加入酶结合物工作液（100u1/孔）。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育20分钟。

　　8.洗板5次，且置厚吸水纸上拍干。

　　9.加入显色剂TMB100u1/孔，避光室温孵育20分钟。

　　10.加入终止液50u1/孔，混匀后即刻测量0D450值。