皮质醇检测试剂盒操作方法及原理

皮质醇检测试剂盒操作方法及原理

[背景]：皮质醇，是糖皮质激素中的一种类固醇激素。在人类中，它由肾上腺中的肾上腺皮质束状带产生，在压力和低血糖时释放，可作为压力的一个生物标志物。皮质醇的产量与ACTH依赖的昼夜节律相关，在早晨达到峰值，随后逐渐降低。皮质醇在很多基质中可被检测到，如血液、粪便、尿液和唾液。血清中90-95%的皮质醇与蛋白结合，包括皮质类固醇结合球蛋白和血清白蛋白。皮质醇主要参与代谢和免疫。在代谢方面，它可促进糖异生、肝糖原沉积和降低葡萄糖利用率。在免疫方面，作为重要的抗炎因子，在过敏、免疫抑制和疾病抵抗中发挥重要作用。异常的皮质醇水平与许多状况有关，包括前列腺癌、抑郁症和精神分裂症。身体组织中皮质醇过高是库欣综合征的诱因。
[检测原理]：本试剂盒采用固相竞争酶联免疫吸附检测技术。兔抗小鼠多克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。皮质醇特异性的单克隆抗体加入至孔中，经过孵育，与固相抗体结合。洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的皮质醇和未标记的皮质醇或样本，竞争结合单克隆抗体上有限的结合位点。在洗涤去除未结合的物质后，加入显色底物，颜色反应的深浅与皮质醇的浓度成反比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长(参考波长 570 - 630 nm)测定吸光度值。                                                           样本类型]：血清、血浆、细胞上清、组织等相关生物样本。                                                              [规格型式]：96孔板、48孔板，可拆卸                                                                                              [保存条件]：试剂盒未拆开，2-8℃保存。已拆开，标准品-20℃保存，其它2-8℃℃保存。                   [有效期]：6个月。

敏感性/Z低检测浓度计算方式：敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性。                                           [变异系数]：板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。                                                                    [回收率]：三组已知的高、中、低浓度样品，进行五次回收率评估，回收率在85%-115%之间。
[需用户自己提供的实验器材和试剂]：                                                                                              1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。